DNA(主要是CpG的)甲基化是其遗传机制和表型效应**为明确的表观遗传性机制。DNA甲基化谱式的变化不仅指导在正常发育过程中细胞谱系特化所依据的基因组转录谱式的改变,且在疾病发生和发展的基因表达异化中起着决定性的作用。为了高效准确的分析基因组中所有的甲基化位点,可采用全基因组甲基化(Whole Genome Bisulfite Sequence,WGBS)。亚硫酸氢盐处理是一种分类5-甲基胞嘧啶和非甲基化碱基的有效方法之一,包括基于序列、熔化温度和交互的分析,WGBS是通过重亚硫酸氢盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶(C)脱氨基转变为尿嘧啶(U),而甲基化的胞嘧啶保持不变,再经PCR将U转变为T,结合NGS便可高效准确地分析基因组中所有甲基化位点。常规全基因组甲基化测序技术通过T4-DNA连接酶,在超声波打断基因组DNA*段的两端连接接头序列。广州全基因组甲基化重测序分析
DNA甲基化是在DNA甲基化转移酶(Dnmt)的作用下将甲基选择性地添加到胞嘧啶上形成5-胞嘧啶的过程,刚被发现时被定义为第五种碱基,实际上它是一种重要的表观遗传学标记,在调控基因表达、维持染色质结构、基因印记、X染色体失活以及胚胎发育等生物学过程中发挥着重大的作用,获得全基因组范围内所有C位点的甲基化水平数据,对表观遗传学的时空特异性研究具有重要意义,Bisulfite甲基化测序是以新一代高通量测序平台为基础,结合全基因组Bisulfite处理和生物信息数据分析技术,进行低成本、高效率、高准确度的全基因组DNA甲基化水平图谱绘制。广州全基因组甲基化重测序分析NA甲基化在DNA复制起始、错配修复等过程中对维持遗传信息的稳定性发挥着重要的作用。
物种的DNA甲基化率通常与物种基因组大小成正比。从细菌的数千个基因进化到高等动物的数万个基因,基因数增长的一个数量级。要管好这么多的基因,在漫长的一生中有规律地关闭或打开基因表达,DNA甲基化这个开关对高等动植物必不可少。转座子是一类在基因组上可以自主复制(或剪切)和移动的**功能元件。如果它们随意移动,对基因组的稳定性具有破坏作用。DNA甲基化对转座子的移动具有抑制作用。通常,物种的基因组越大,其基因组中转座子的比例越高,那么限制转座子移动的门神——DNA甲基化的比例就越高。
DNA甲基化是指生物体在DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DMT) 的催化下,以s-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,将甲基转移到特定的碱基上的过程。DNA甲基化能降低某些基因的表达活性,去甲基化则能引起基因的重新活化和表达。DNA甲基化能引起染色质的结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质之间的相互作用方式的改变,从而影响基因表达。研究证实,CpG二核苷酸中胞嘧啶的甲基化导致了人体1/3以上由于碱基变异而引起的遗传性疾病。由于DNA甲基化与人体发育和tumour疾病的密切关系,特别是CpG岛甲基化引起的抑cancer基因的转录失活,使得DNA甲基化成为表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容。Hi-MethylSeq在研究DNA甲基化时,每一个read都相当于克隆测序时的一个单克隆。
DNA甲基化是一种表观遗传修饰,它是由DNA甲基转移酶(DNA methyl-transferase, DNMT)催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)作为甲基供体,将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶(mC)的一种反应,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是**主要的甲基化位点,它在基因组中呈不均匀分布,存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域,在哺乳动物中mC约占C总量的2-7%。甲基化检测服务-亚硫酸氢钠处理后测序法 (bisulfite genomic sequencing PCR, BSP)是利用未甲基化的胞嘧啶可以被亚硫酸氢钠发生脱氨基变为尿嘧啶的原理,用两一特异性引物扩增后测序。测序法克服了只能针对单个位点检测,并且这些位点必须是限制性内切酶识别位点的缺点,可以对任何基因序列的甲基化状态进行检测。目标区域甲基化重测序(Hi-Methylseq)结合了亚硫酸盐转换、靶向扩增子高通量测序技术。浙江CPG岛甲基化重测序技术服务
常规全基因组甲基化测序技术通过T4-DNA连接酶,在超声波打断基因组DNA段的两端连接接头序列。广州全基因组甲基化重测序分析
DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表观。 DNA甲基化在维持细胞正常功能、传递基因组印记,胚胎发育、tumour发生等方面发挥重要作用,目前已经成为表观遗传学和表观基因组学的研究热点。DNA甲基化测序可在全基因组水平上比较大限度的、完整的获取甲基化状态信息和与基因表达调控的多重关系,可高效精确完成全基因组甲基化测序及*分辨DNA甲基化谱式绘制,并可对发现的靶点区进行甲基化特异性PCR验证。广州全基因组甲基化重测序分析
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