亚硫酸氢钠转化是分析胞嘧啶甲基化效果比较好的工具之一。该方法基于亚硫酸氢钠对 DNA 的处理，确定其甲基化模式。重亚硫酸盐测序本质上就是重亚硫酸盐转化与二代测序（NGS）的结合。甲基化的金标准是亚硫酸氢盐测序法：用亚硫酸氢盐处理DNA，未发生甲基化的胞嘧啶能够被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶则保持不变，通过后续的测序即可检测。利用亚硫酸氢盐的这种原理，可以衍生出多种甲基化检测方法，如甲基化特异性的PCR和高分辨率熔解曲线法。全基因组DNA甲基化测序是用 Bisulfite 处理DNA序列。杭州目标位点甲基化重测序哪里做
全基因组重亚硫酸盐测序（whole genome bisulfite sequencing，WGBS）用于全基因组DNA甲基化检测：表观遗传学研究已经证实了特定基因区域的DNA甲基化修饰对于染色体构象、基因表达调控机制有着重要影响，而全基因组DNA甲基化研究是表观基因组学关注的重要内容。Bisulfite处理能够将基因组中未发生甲基化的C碱基转换成U，进行PCR扩增后变成T，与原本具有甲基化修饰的C碱基区分开来，再结合高通量测序技术，可绘制单碱基分辨率的全基因组DNA甲基化图谱。浙江目标区间甲基化重测序哪里好DNA甲基化主要发生在CpG位点。在哺乳动物中，70%到80%的CpG位点的胞嘧啶是甲基化的。
DNA甲基化可以抑制基因表达。其机制是当DNA甲基化出现在启动子区，其会强化启动子序列的异染色质化（染色体拧巴在一起），而使转录起始复合物无法接近和结合，从而强化基因的转录抑制。只有保持开放性常染色质状态的转录起始位点，才能保证转录起始蛋白复合物可接近并结合这个区域，从而保证基因的转录表达。当DNA甲基化出现在编码基因不同区域的时候（上游，基因区或下游），其对基因表达的影响也是不同的。同时，DNA甲基化不仅只影响基因转录，实际上其与组蛋白修饰、DNA突变、小RNA表达等都有非常复杂的相互调控作用。
DNA甲基化是指在甲基转移酶的催化下，DNA的CG二核苷酸中的胞嘧啶被选择性的添加甲基，形成5-甲基胞嘧啶，常见于基因的5′—CG—3′序列。DNA甲基化的位置主要集中在基因5′端的非编码区，DNA高度甲基化首先会影响DNA结构，进而阻遏基因转录，引起基因沉默。DNA甲基化为非编码区（如内含子等）的长期沉默提供了一种有效的抑制机制。基因启动区域内CpG位点的甲基化通过三种方式影响基因转录活性：DNA序列甲基化直接阻碍转录因子的结合；甲基CpG结合蛋白结合到甲基化CpG位点与其他转录抑制因子相互作用；染色质结构的凝集阻碍了转录因子与其调控序列的结合。常规全基因组甲基化测序技术通过T4-DNA连接酶，在超声波打断基因组DNA*段的两端连接接头序列。
全基因组重亚硫酸盐甲基化测序（WGBS）可以在全基因组范围内精确的检测所有单个胞嘧啶碱基（C碱基）的甲基化水平，是DNA甲基化研究的金标准。WGBS能为基因组DNA甲基化修饰的研究提供重要技术支持，能广泛应用在个体发育、衰老和cancer发生等生命过程的机制研究中。其原理是用 Bisulfite 处理DNA序列，首先将基因组中未发生甲基化的 C 碱基转换成U（T），从而与原本具有甲基化修饰的碱基C区分开来，然后进行PCR扩增，结合高通量测序技术，适用于全基因组范围内绘制单碱基分辨率的DNA 甲基化图谱。NA甲基化在DNA复制起始、错配修复等过程中对维持遗传信息的稳定性发挥着重要的作用。目标区域甲基化重测序机构
亚硫酸盐处理这种方法可靠，且精确度高，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态。杭州目标位点甲基化重测序哪里做
DNA甲基化作为一种重要的表观修饰，在调控基因的时空特异性表达中扮演着关键的角色，参与了X染色体失活、基因组印记和重复序列抑制等诸多生命过程。哺乳动物细胞的DNA甲基化主要发生在CpG二核苷酸对的C（胞嘧啶）上，并在有丝分裂过程中得以相对稳定的维持，这对细胞保持谱系特性有着重要的意义。上海翼和应用生物技术有限公司自主研发的Hi-MethylSeq技术，可对对大规模群体的候选基因甲基化水平进行检测。上海翼和生物是上海市遗传学会理事单位。杭州目标位点甲基化重测序哪里做
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