常用的纯化方法冷冻结晶法 冷冻结晶法是在低温的条件下,依据混合脂肪酸各组分的凝固点差异进行纯化,进而达到纯化多不饱和脂肪酸的目的。将混合脂肪酸溶解在**或乙醇中,置于低温下,在溶液中短链脂肪酸较长链脂肪酸的溶解度低,饱和脂肪酸较不饱和脂肪酸的溶解度低,这种溶解度差异随温度降低表现更为。 冷冻结晶法工艺原理简单,操作方便,有效成分不易发生变性反应。但其操作过程中温度要求苛刻,需要回收大量的有机溶剂,纯化效率不高,这限制了大规模的生产,但可以用于生产低成本的保健品类,从而满足中低层消费者的需求。广州分离纯化微球制造厂家
纳米微球的应用极其***,几乎渗透到所有的产业:无论是新医药,平板显示,食品 安全检测,医疗诊断,还是水处理,节能环保,石油化工,**安全等都离不开先进 纳微米球材料。 在制药领域: 纳米孔道结构的微球材料具有极高的比表面积(1克微球材料的比表面积相 当于一个足球场的面积),因此具有极强的吸附性能,如果在微球表面键合特殊功能基 团使它可以选择性吸附某些物质,这一特性使得纳米微球材料成为所有生物药和天然 药分离纯化过程中不可缺少的材料,另外气相和液相色谱是当今医药分析检测**常用 的方法,而色谱**的材料就是微球材料。在***制剂领域,微球也是理想的***缓 控释的载体,当有效组份负载在空心或多孔的纳米微球载体中可以使***在人体里缓 慢释放,以减小***的毒负作用,增加***的有效性。由磁性材料组成的多孔微球可 作为靶向释药系统的载体,在外加磁场的作用下,将***载至预定区域,可使免疫磁 性微球上的******更易与*细胞接触,提高了杀伤*细胞的效果。 杭州分离纯化微球销售厂家
纯化抗体 制备高特异性、价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将直接影响试验的成败。 通过不同方法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在一起,为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要进行抗体纯化。从成分的角度分析, 抗体分子是一类蛋白质分子,与其他蛋白质一样,它有一定的等电点、溶解度、荷电性及疏水性,可以用电泳、 盐析沉淀或其他层析技术进行分离、 纯化。 技术 免疫亲和纯化是另一种可能需要纯化抗体的技术。在这一技术中,抗体共价交联到一固相基质上,如交连的琼脂糖或聚丙烯酰胺微球。常用的方法是,先将抗体纯化,然后连接到通过化学方法***而具有结合位点的微球上。此时,抗体的纯化对实验的成功至关重要。
微球是直径在纳米和微米尺度范围的球型粒子。球形物体是自然界存在**稳定的物质形态, 它是三维几何空间理想的对称体,也是单位体积中所有立体形态中面积**小的。自然界大 到星球如地球,小到篮球,乒乓球,玻璃珠等都是球体。 地球直径是1.28万千米,而篮球 直径是0.25米,1纳米等于十亿分之一米,相当于一根头发丝横切面的六万分之一,如果拿 纳米的微球与篮球相比,就相当于篮球与地球之比例。 如此之小的纳米微球材料却是现代 产业发展的重要基础。
磁性高分子微球的制备
目前制备磁性高分子纳米微球的方法主要分为五类,其主要包括:包埋法、原位法、单体聚合法、界面沉积法及自组装法。
2.1包埋法
包埋法是将聚合物溶解在含有磁性超微粒子的溶液中,然后加入大量的沉淀剂,通过交联、絮凝、雾化、沉积、蒸发等手段使高分子物质沉析在磁性粒子表面形成具有核壳结构的复合微球。高分子物质与磁性粒子主要通过范德华力、氢键、螯合作用或共价键等作用力结合。Li等通过化学共沉淀法合成纳米粒子Fe3O4磁核,以壳聚糖为包裹材料包被自制的磁核,采用乳化交联法制备了具有核-壳结构的磁性高分子微球-壳聚糖磁性微球,并偶联肝素配基得到了一种新型亲和磁性微球。所得亲和磁性微球具有较窄的粒径分布、形状规整,粒径在50nm左右。将磁分离技术应用于凝血酶的分离纯化,得到了较好的效果(酶比活达1879.71U/mg,得率85%,纯化倍数11.057,为传统柱层析法的两倍)。Chifiriuc等将含Fe2+和Fe3+溶液逐滴加入壳聚糖的NaOH溶液中制的可用于负载头孢霉素的磁性壳聚糖微球。
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摘要: 本发明提供了一种磁性微球分离纯化纳豆激酶的方法。将表面偶联有亲和配基的磁性微球加入到纳豆激酶的发酵液中,在室温下缓慢搅拌充分混合,使纳豆激酶特异性地吸附在磁性微球表面;采用磁铁将吸附有纳豆激酶的磁性微球从发酵液中分离出来,用缓冲溶液清洗一次去除杂质,再用解析液进行解析,收集到纳豆激酶的洗脱液;***经过冷冻干燥得到纳豆激酶产品。分离后纳豆激酶的活力为85%,纯化因子为6.0。本发明具有周期短、操作简单、生产成本低且易于规模化生产等优点。 利要求: 一种磁性微球分离纯化纳豆激酶的方法,其特征在于,所述的纳豆激酶分离纯化方法包括以下几个步骤:(1)纳豆激酶发酵液的制备从固体培养基上挑取纳豆激酶的单菌落接入20-100mL的种子培养基中,摇床中培养12-24h,按2%-6% 接种量接入发酵液体培养基中,在25-37℃下发酵罐培养24-48h,液体发酵结束后,通过离心除去菌体,得到纳豆激酶发酵液;(2)亲和配基在磁性微球上的固定化将自制的磁性高分子微球进行表面功能化修饰得到表面含有环氧功能基团的磁 性微球,在50-80℃条件下,以氢氧化钠为催化剂,进行亲和配基的固定化反应,获得表面含有亲和广州分离纯化微球制造厂家
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