支原体污染和黑胶虫污染是两种不同类型的细胞培养污染,它们具有各自的特点和区别: 支原体污染:在相差显微镜下,支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。 黑胶虫污染:在高倍镜下,被黑胶虫污染的细胞膜会变得模糊不清,边界不清晰,有粗糙感。 污染的影响: 支原体污染:可能导致细胞增殖缓慢,甚至从...
查看详细 >>在科研中,支原体检测是确保细胞培养纯净性的重要环节。以下是一些在科研中常见的支原体检测方法: 1. 支原体培养法:这是一种传统的检测方法,通过将细胞培养物接种到特定的培养基中,观察是否有支原体生长。这是直接的检测方法,但耗时较长,通常需要数周时间。 2. DNA染色法:使用荧光染料(如Hoechst或DAPI)染色细胞核...
查看详细 >>细胞被支原体污染后可能会出现以下几种情况: 1. 生长速度变慢:支原体污染的细胞生长速度可能会减慢,甚至停止生长。 2. 形态改变:部分细胞可能会变圆,从培养瓶壁脱落。有些细胞在支原体污染后,形态变化可能不明显,但有些细胞可能会出现体积增大、细胞碎片增多等现象。 3. 培养液pH变化:支原体污染的细胞可能导致培养液p...
查看详细 >>细胞培养中支原体检测出现假阳性结果可能由以下原因引起: 1. 扩增产物污染:PCR扩增产生的大量DNA拷贝若未妥善处理,极微量的污染就可能导致假阳性结果。 2. 引物设计不当:引物设计不够特异性,可能会与非目标序列发生反应,导致非特异性扩增。 3. 试剂质量问题:使用的dNTPs、引物、DNA聚合酶等试剂质量不佳,可...
查看详细 >>支原体去除后对细胞检测的影响主要取决于去除方法和去除后的处理。以下是一些可能的影响: 1. 去除方法的影响:不同的支原体去除方法可能对细胞检测产生不同的影响。例如,一些去除方法可能会对细胞的代谢和增殖产生暂时性的影响,这可能会影响某些类型的细胞检测。 2. 去除后的处理:去除支原体后,细胞可能需要一段时间来恢复其正常的生理...
查看详细 >>检测新鲜培养基是否有支原体污染,可以采用以下五种方案: 1. 培养法:这是一种传统且可靠的方法,通过将培养基接种到适宜支原体生长的微生物培养基或琼脂平板上,观察是否有支原体生长。这种方法较为耗时,但成本较低。 2. 荧光染色法:使用特定的荧光染料(如Hoechst 33258)对细胞进行染色,然后在荧光显微镜下观察。如果存...
查看详细 >>免疫沉淀Co-IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ,它能够直接高效、快速结合抗体,而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构,这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触,具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同,磁...
查看详细 >>免疫沉淀纯化所得抗原量低有多种原因, A. 纯化所得抗原量低 1. 抗原结合水平低 IP 应用中出现低抗原结合水平的可能原因有很多,结合反应所使用的溶液是重要原因之一。必须使用适合的缓冲液,有特定的pH和盐浓度,可能还需要添加互作所需的辅助因子。IP 或Co-IP 中用于纯化的抗体是影响得率的另一个重要因素。如果抗体...
查看详细 >>支原体污染的来源主要包括以下几个方面: 1. 实验室环境中可能存在支原体污染源,如空气中的尘埃、其他培养物中的支原体污染等。 2. 实验操作人员的手部、衣物或皮肤表面可能携带支原体,造成细胞培养的污染。 3. 培养基、血清等培养材料如果受到支原体污染,也会导致细胞培养物受到污染。 4. 细胞交叉污染,即使用已受...
查看详细 >>免疫沉淀(Co-IP)实验中抗体的选择非常关键,因为抗体的特异性和亲和力直接影响到实验的成功与否。 1. 特异性:抗体应当对目标蛋白具有高度的特异性,以避免与其他蛋白发生非特异性结合,导致假阳性结果。 2. 亲和力:抗体对目标蛋白的亲和力要足够高,以确保在免疫沉淀过程中能够有效地捕获目标蛋白。 3. 抗体类型:单克隆...
查看详细 >>免疫沉淀ChIP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ,它能够直接高效、快速结合抗体,而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构,这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触,具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同,磁珠...
查看详细 >>支原体检测的应用场景非常广*,以下是一些主要的应用领域: 1. 细胞培养:在实验室和生物制品工厂中,细胞培养过程容易受到支原体污染。支原体污染可能导致细胞功能改变,影响实验结果和生物制品的质量。因此,支原体检测在细胞培养的质量控制中至关重要。科研中常用等温扩增的方法简单便捷。 2. 生物制品生产:在生物制品的生产过程中,...
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