细胞培养中,支原体检测的重要性体现在以下几个方面: 1. 高污染发生率:支原体对培养细胞的污染发生率非常高,据估计平均发生率在60%左右。 3. 隐匿性强:支原体污染具有很高的隐匿性,早期不容易被发现,除非使用特异性和灵敏度都非常高的专业检测试剂盒。 3. 影响实验结果:支原体污染会改变细胞的生理性质,影响实验...
查看详细 >>RNA免疫沉淀技术(RIP)是一种研究RNA与蛋白质相互作用的重要方法,其应用领域主要包括: 1. 转录后调控研究:RIP技术可以帮助研究者了解RNA在转录后水平如何被调控。 2. 表观遗传调控:RIP技术用于研究RNA结合蛋白(RBPs)在表观遗传调控中的作用。 3. 非编码RNA功能研究:RIP技术可以用来研究长...
查看详细 >>真核生物的基因组 DNA 以染色质(Chromatin)的形式存在。因此,研究蛋白质与 DNA 在染色质环境中的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径,而染色质免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,ChIP)技术是目前公认的研究此相互作用的选择,是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。 ...
查看详细 >>免疫沉淀(Co-IP)实验中抗体的选择非常关键,因为抗体的特异性和亲和力直接影响到实验的成功与否。 1. 特异性:抗体应当对目标蛋白具有高度的特异性,以避免与其他蛋白发生非特异性结合,导致假阳性结果。 2. 亲和力:抗体对目标蛋白的亲和力要足够高,以确保在免疫沉淀过程中能够有效地捕获目标蛋白。 3. 抗体类型:单克隆...
查看详细 >>Co-IP(免疫共沉淀)技术主要用于研究蛋白质之间的相互作用,其实验设计如下: 1. 样品准备:Co-IP实验通常有两种,一种是内源性蛋白相互作用验证,一种是非内源性蛋白相互作用验证。内源性相互作用通过质粒共转染的方式将两种蛋白转染至同一细胞内表达;非内源性相互作用则是将含有靶蛋白的组织进行预处理及细胞裂解获得细胞裂解液。 ...
查看详细 >>需要定期检测支原体污染的客户主要包括以下几类: 1. 生物医药企业:生产涉及细胞培养的生物制品的公司,包括疫苗、生物药物、基因产品等。 2. 细胞公司:进行细胞产品的研发和生产的企业,需要确保所用细胞的安全性和有效性。 3. 科研机构:从事细胞生物学、分子生物学、遗传学等研究的学术机构,需要保证实验结果的准确性...
查看详细 >>方法 灵敏度 优势 劣势 培养法 ☆☆☆ ...
查看详细 >>ChIP(染色质免疫沉淀)实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验设计概述: 1. 目标蛋白的选择:确定您想要研究的目标蛋白,例如特定的转录因子或组蛋白修饰。 2. 样本的准备:根据研究的需要选择合适的细胞或组织样本。 3. 抗体的选择:选择具有高特异性和亲和力的抗体,这对于实验的成功...
查看详细 >>支原体是一类细菌,由于缺乏细胞壁,具有灵活的膜结构。这使得支原体的形态多变,很难在高倍显微镜下识别。并且能够抵抗压力、温度、渗透压和脱水,对许多针对细胞壁合成的常见抗*素具有抗性。它们的体积非常小,直径通常在0.15~0.3μm,因此能够轻易地穿过过滤系统。支原体能在哺乳动物细胞培养中可以高浓度生长,而不引起明显的混浊或其他可见的污染...
查看详细 >>细胞培养中支原体检测出现假阴性结果可能由以下原因引起: 1. 样本质量问题:如果采集的样本中含有抑制剂或者样本在处理、存储过程中出现问题,可能会影响PCR反应,导致假阴性。 2. 技术或操作问题:实验操作中的误差,如样本处理不当、试剂配制错误、仪器设备问题等,都可能导致假阴性结果。 3. 检测方法的局限性:某些检测方...
查看详细 >>免疫沉淀纯化所得抗原量低有多种原因, A. 纯化所得抗原量低 1. 抗原结合水平低 IP 应用中出现低抗原结合水平的可能原因有很多,结合反应所使用的溶液是重要原因之一。必须使用适合的缓冲液,有特定的pH和盐浓度,可能还需要添加互作所需的辅助因子。IP 或Co-IP 中用于纯化的抗体是影响得率的另一个重要因素。如果抗体...
查看详细 >>染色质免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,ChIP)技术是目前公认的研究此相互作用的选择,是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。 它的基本原理是在活细胞状态下,固定蛋白质-DNA(染色质)复合物,并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法(抗体亲和)沉淀此复合体,特异...
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