它的原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理情况,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶...
减少或消除非特异性染色的方法 组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称为非特异性背景染色,较好常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶元和结缔组织成分上。有效方法是在用首先抗体前加制备第二抗体动物之非免疫血清(...
免疫组化可以辅助病理诊断、指导、评估预后,所以在做免疫组化过程中的质控问题处理尤其重要。免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借...
免疫组化,是应用免疫学基本原理—抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及...
Ct值与模板拷贝数的关系:理想情况下,qPCR的模板经过一定的循环数进行指数扩增,扩增循环数和产物量之间的关系是:扩增产物量Cn=起始模板量C1×(1+扩增效率E)^循环数n。但是由于E通常无法达到1...
与Ct值有关的参数:标准曲线Standardcurve:模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标表示起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。相...
量化校准器可以纯化靶分子,如RNA合成或DNA寡核苷酸生成完整PCR扩增,质粒DNA结构,cDNA克隆成质粒,RNA体外转录,参考RNA,特定生物样品的RNA或者DNA,或者国际公认的生物标准(如果有...
提取样本中的RNA定量分析很重要,因为比较不样本时,使用大致相似相同数量的RNA是明智的。平常使用的有几种量化方法,如分光光度法(NanoDrop;ThermoScientific),微流控分析法(A...
什么是CT值比较法?数据怎么处理?CT值与起始DNA浓度的对数成反比:如果:不同管之间的PCR反应效率相同。这些PCR的反应效率接近100%。可以从上面的公式推出相对含量(X01/X02)=2-ΔCT...
什么是CT值比较法?数据怎么处理?CT值与起始DNA浓度的对数成反比:如果:不同管之间的PCR反应效率相同。这些PCR的反应效率接近100%。可以从上面的公式推出相对含量(X01/X02)=2-ΔCT...
1、SYBRGreen在高浓度情况下会抑制PCR反应,但普通的qPCR2×Mix是不会出现这样的情况;2、蛋白的检测确实可以说明表达的问题,泛素化、磷酸化也能检测蛋白的作用,其实检测mRN...
以下信息qPCR试验必须提供的:数据库登陆每个靶基因和参考基因的数目,每个引物和任何探针的外显子位点,每个寡核苷酸的浓度和序列,包括性质、位点和结合任何染料和/或修饰碱基。同样需要聚合酶的名称和浓度,...